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高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography,簡稱HPLC)又稱高壓液相色譜法(highpressureliquidchromatography)、高速液相色譜法(highspeedliquidchromatogra-phy),是液相色譜法的一種,也是色譜法的一個分支。它是在20世紀(jì)60年代末,以經(jīng)典柱色譜法為基...[繼續(xù)閱讀]
保留值是表示樣品中各組分在色譜柱中的停留時間的數(shù)值或表示流動相將組分帶出色譜柱所需的液體體積。當(dāng)分離條件一定時,同種物質(zhì)因分布系數(shù)的關(guān)系總是具有相同的保留值,故可用來作定性分析的指標(biāo)。[死時間]又稱非保留時間...[繼續(xù)閱讀]
在平衡狀態(tài)時組分在固定相與流動相中的濃度之比,用下式表示時:K=CS/CLCS表示組分在固定相中的濃度;CL表示組分在流動相中的濃度。...[繼續(xù)閱讀]
在色譜平衡狀態(tài)時,組分在固定相與流動相中的質(zhì)量比,用下式表示:k′為容量因子,K為分配系數(shù),Vs為組分在固定相中的體積,VR為組分在流動相中的體積,t′R為校正保留時間,t0為死時間。上式反映了色譜柱內(nèi)有關(guān)樣品成分的分布狀態(tài),一...[繼續(xù)閱讀]
在對混合物進(jìn)行分離時,把表示從色譜柱洗脫出來的各成分的分離狀態(tài)的分離因子稱為分離系數(shù)(separationfactor),用α值表示。α值代表了二個物質(zhì)在相同的色譜條件下的分離選擇性,可用下式表示:V1、V2分別為化合物A、B的保留體積;k′...[繼續(xù)閱讀]
理論塔板數(shù)(theoreticalplatenumber)是反映物質(zhì)在固定相和流動相中動力學(xué)特性的重要色譜參數(shù),它是代表色譜分離效能的指標(biāo)。理論塔板數(shù)可由下式計算。由峰底寬W=4δ,上式則可寫為:也可采用峰半寬Wt/2來計算N:[有效塔板數(shù)(N有效)]理論塔...[繼續(xù)閱讀]
分離度(也稱分辨率resolution)是定量描述混合物中相鄰兩組分在色譜柱中分離效能的主要指標(biāo),用Rs表示,Rs值越大,兩個相鄰色譜峰分離的越好。圖1-1所示的色譜圖表示相鄰的兩個化合物A、B的分離狀態(tài)。圖1-1二成分色譜分離圖如圖1-1所...[繼續(xù)閱讀]
改變α是改變后一組分相對前一組分的保留時間。α變大,則峰的間隔相對變大,分離度Rs也增加。α的改變可以選擇不同的固定相或流動相來實現(xiàn)。但改變固定相在液相色譜中比較麻煩,如在一個色譜系統(tǒng)中用二根不同固定相的柱子,則...[繼續(xù)閱讀]
增加N來提高分離度,就是使色譜峰變狹,從而使二個相鄰的峰分開。由表1-4可見,N增加一倍,Rs只提高0.4倍。a越小,達(dá)到給定的Rs所需要的N數(shù)越大,隨著a的減小這種趨向越厲害。由此也可說明,適當(dāng)增加a(如用梯度淋洗)可降低所要求的N(減...[繼續(xù)閱讀]
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