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    一、材料的選擇實驗材料的選擇主要依據待分離制備的生物大分子物質的含量和性質而定。一般來說,動物或人體組織中的有效成分含量較低,如胰臟組織中胰島素的含量極低,含量小于其鮮重的百萬分之一;腫瘤組織中微小RNA (microRN...[繼續(xù)閱讀]

    細胞是生物體結構和功能的基本單位。就真核生物而言,細胞除了有細胞膜、細胞質和細胞核外,還有線粒體、溶酶體和內質網等細胞器。除了某些細胞外的多肽激素和某些蛋白質與酶以外,對于細胞內或多細胞生物組織中的各種生物...[繼續(xù)閱讀]

    抽提通常是指在分離純化之前將經過預處理或破碎的細胞置于溶劑中,使被分離的生物大分子充分釋放到溶劑中,并盡可能保持原來的天然狀態(tài)不丟失生物活性的過程。這一過程是將目的產物與細胞中其他化合物和生物大分子分離,即...[繼續(xù)閱讀]

    一般粗提液的體積都比較大,應經過進一步濃縮和分離純化處理。常用的濃縮和純化方法和技術有沉淀法(包括鹽析、有機溶劑沉淀、選擇性沉淀等)、透析、超過濾、冷凍干燥、離心、吸附層析、凝膠過濾層析、離子交換層析、親和...[繼續(xù)閱讀]

    生物大分子制成品的正確保存極為重要,一旦保存不當,造成樣品失活、變性、變質,將會使前面的全部制備工作化為烏有,前功盡棄,損失慘重。影響生物大分子樣品保存的主要因素有:(1)空氣:空氣的影響主要是潮解、微生物污染和自動...[繼續(xù)閱讀]

    生物大分子制備方案是在分離純化過程中幾種方法聯合使用的總稱,它是以達到樣品純化目的為前提的。制備方案設計合理,就能達到事半功倍的效果。本節(jié)主要討論生物大分子制備方案的設計和評價。一、方案設計鑒于樣品制備方案...[繼續(xù)閱讀]

    一、離心基本原理當含有細小顆粒的懸浮液靜置不動時,重力場的作用使得懸浮的顆粒逐漸下沉。粒子越重,下沉越快,反之密度比液體小的粒子就會上浮。微粒在重力場下移動的速度不僅與微粒的大小、形態(tài)和密度有關,而且與重力場...[繼續(xù)閱讀]

    離心機可分為工業(yè)用離心機和實驗用離心機。實驗用離心機又分為制備型離心機和分析型離心機。制備型離心機主要用于分離各種生物材料,每次分離的樣品容量比較大;分析型離心機一般都帶有光學系統(tǒng),主要用于研究純的生物大分...[繼續(xù)閱讀]

    差速離心是指低速與高速離心交替進行,使各種沉降系數不同的顆粒先后沉淀下來,達到分離的目的。沉降系數差別在一個或幾個數量級的顆粒,可以用此法分離。樣品離心時,在同一離心條件下,沉降速度不同,通過不斷增加相對離心力...[繼續(xù)閱讀]

    密度梯度離心法又稱為區(qū)帶離心法,它是將樣品加在惰性梯度介質中進行離心沉降或沉降平衡,在一定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同區(qū)帶的分離方法。此法的優(yōu)點是:①分離效果好,可一次獲得較純顆粒;②適...[繼續(xù)閱讀]