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目前常用的檢測技術(shù)有Southern印跡雜交、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增及在PCR技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的其他檢測方法。Southern印跡雜交Southern印跡雜交是由Korsmeyer等人在1981年發(fā)明的一項(xiàng)檢測技術(shù),并于1983年被應(yīng)用于淋巴細(xì)胞基因重排的檢測...[繼續(xù)閱讀]
盡管PCR技術(shù)是當(dāng)前檢測淋巴組織基因重排的主要方法,但由于PCR技術(shù)的高靈敏性,容易出現(xiàn)假陽性。同時由于Ig和TCR重排基因的廣譜性,使得有限引物進(jìn)行擴(kuò)增時容易出現(xiàn)假陰性。再者,石蠟包埋組織等DNA降解,也容易導(dǎo)致假陰性的出現(xiàn)。...[繼續(xù)閱讀]
▲幾乎所有類型的淋巴瘤都有染色體異常。與癌不同的是,NHL常存在頻發(fā)性、非隨機(jī)性細(xì)胞遺傳學(xué)異常,尤其染色體易位,與臨床表現(xiàn)、組織病理學(xué)和免疫表型密切相關(guān)?！鴳?yīng)用傳統(tǒng)的細(xì)胞遺傳學(xué)分析(核型分析)和分子細(xì)胞遺傳學(xué)分析...[繼續(xù)閱讀]
兩個核酸分子堿基序列互補(bǔ),就可在適宜條件下形成穩(wěn)定的雜交分子。FISH就是利用這一原理將標(biāo)記探針(標(biāo)記了生物素、地高辛或熒光素)與組織、細(xì)胞核或染色體DNA(玻片上的標(biāo)本)進(jìn)行雜交,經(jīng)熒光檢測系統(tǒng)觀察熒光信號在染色體上的...[繼續(xù)閱讀]
其基本操作步驟可概括為標(biāo)本制作與預(yù)處理→標(biāo)記探針→將探針與待檢標(biāo)本靶序列雜交→雜交結(jié)果檢測。▲檢測時可先將組織固定到顯微載玻片上,并對靶組織進(jìn)行各種預(yù)處理,如用蛋白酶消化去除蛋白,常能增加結(jié)果信號強(qiáng)度。▲雜...[繼續(xù)閱讀]
以檢測t(14;18)染色體易位為例具體說明。石蠟包埋組織提取細(xì)胞核▲首先對組織塊切片后進(jìn)行HE染色,在顯微鏡下確定腫瘤細(xì)胞密集的部位,切20μm厚石蠟切片,對照HE切片利用顯微切割儀將腫瘤周圍正常組織和壞死組織切除?！鴮⑹炃?..[繼續(xù)閱讀]
4.5.1淋巴瘤染色體異?！馨图?xì)胞從原始的胚系構(gòu)型到分化成熟,其抗原受體(Ig和TCR)基因通過基因重排而形成有功能的基因?！粋€B淋巴細(xì)胞或其克隆性后代,均只含一種獨(dú)特的分子遺傳學(xué)標(biāo)記,一旦某一克隆的淋巴細(xì)胞發(fā)生惡性變化...[繼續(xù)閱讀]
▲目前可用于淋巴瘤的DNAFISH商品化探針有CCND1/IgHt(11q13;14q32),C-MYC/IgHt(8q24;14q32),ALK(2p23),BCL2/IgHt(14q32;18q21),BCL6(3q27),IgH等?！嚓P(guān)染色體異常檢測。(表2-2)表2-2FISH商品化探針及相關(guān)染色體異常檢測淋巴瘤類型染色體易位基因探針類型AL...[繼續(xù)閱讀]
流式細(xì)胞技術(shù)是對流式單個細(xì)胞及微粒進(jìn)行檢測的技術(shù)。盡管被稱為流式細(xì)胞儀,但實(shí)際上,流式細(xì)胞儀不僅可以處理細(xì)胞,也可以處理染色體、分子、乳膠微球或許多其他能在液體中懸浮的顆粒。因此,流式細(xì)胞儀可廣義地定義為:能檢...[繼續(xù)閱讀]
流式細(xì)胞技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在診斷性血液病理學(xué)方面,流式細(xì)胞技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn)有:▲區(qū)別良性增生與惡性淋巴瘤及淋巴瘤的亞型分類。▲結(jié)果快速。▲通過檢測細(xì)胞的大小(FSC)和顆粒性(SSC),可以確定不同的細(xì)胞群體?！ㄟ^設(shè)門可以將死細(xì)...[繼續(xù)閱讀]
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